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猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定

曹瑞兵周斌陈德胜陈溥言

Nanjing nongye daxue xuebao, 2003, Vol.26 (2), p.71-75 [同儕審閱期刊]

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題名:
猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定
著者: 曹瑞兵周斌陈德胜陈溥言
主題: 基因克隆 ; 基因改造 ; 基因表达 ; 活性 ; 猪γ干扰素 ; 细胞病变抑制法
所屬期刊: Nanjing nongye daxue xuebao, 2003, Vol.26 (2), p.71-75
描述: 提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA，RT—PCR扩增出猪IFN—γ基因并克隆到pGEM—T—easy载体，测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN—γ的完整基因。设计1对引物亚克隆猪IFN—γ成熟蛋白基因并对其5’端前2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造。经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC，并实现在大肠杆菌中的高效表达。表达产物以包涵体形式存在，经7mol·L^-1盐酸胍的变性液溶解及0．5mol·L^-1盐酸胍复性液复性处理，表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化。细胞病变抑制法测定结果表明，重组猪IFN—γ具有较高的干扰素活性，约为4．5×10^6U·mg^-1。
出版者: 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
語言: 中文
識別號: ISSN: 1000-2030
DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2003.02.017
資源來源: Alma/SFX Local Collection

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