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猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达
曹瑞兵 徐学清 周斌 陈德胜 陈溥言
Shengwu gongcheng xuebao, 2004, Vol.20 (2), p.291-294
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猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达
著者:
曹瑞兵 徐学清 周斌 陈德胜 陈溥言
主題:
poIFN-α1
;
α1-干扰素
;
包涵体
;
原核表达
;
基因
;
大肠杆菌
;
抗病毒活性
;
猪
所屬期刊:
Shengwu gongcheng xuebao, 2004, Vol.20 (2), p.291-294
描述:
poIFN-α1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子,为了获得高表达,使用了大肠杆菌的偏爱密码子,人工合成了poIFN-α1成熟蛋白编码基因。在保留编码蛋白序列的同时,使其5′端A+T的含量增加到最大限度,并将其终止密码子改为TAA。将合成的poIFN-α1成熟蛋白编码基因插入原核单纯表达载体pRLC中,转化大肠杆菌DH5α。实现了poIFN—α1在大肠杆菌中的高效表达,表达产物以包涵体形式存在。纯化的包涵体经含DTT的6mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSH-GSSG的复性液复性处理,复性后的表达产物浓缩后经凝胶层析纯化,细胞病变抑制法测定表明,重组poIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为6.4×10^6u/mg。
出版者:
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
語言:
中文
識別號:
ISSN: 1000-3061
DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.02.026
資源來源:
Alma/SFX Local Collection
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